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重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一轮循环需2~4分钟，如此反复进行，每一轮循环所产生的DNA均能成为下一轮循环的模板，每一轮循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增1倍，PCR产物以2的指数形式迅速扩增，经过25~30轮循环后(2~3小时)，理论上可使***扩增109倍以上，实际上一般可达106~107倍。


实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平，这就是分析荧光数据的水平。


BioMark HD系统是将通量与敏感度集于一体的自动化***分析平台，并将***表达的研究深入到单细胞水平。与传统qPCR检测方法相比，BioMark HD系统仅需10 pg的起始实验材料，即可对群体或者单细胞进行表达谱分析，并且能在一张芯片上对多样本、多***同时进行检测。多种规格的芯片能够满足从低到高的不同通量，适用于广泛的研究需求，而且样本和***指标自由组合，用户弹性大。大量文献表明芯片内和芯片间的数据结果相关性高达0.99，具有优的重复性。

当PCR循环阶段完成后，PCR扩增仪通常被设置为将样品“保持”在4℃，直到用户将其从仪器中取出。

将样品块冷却到这个温度，特别是长时间的冷却，会给样品块带来不必要的压力，并有可能使其寿命缩短10倍之多。为了避免这种情况，可以在程序结束后立即取出样品，或者将仪器设定为在室温下保持样品。

这对PCR产物的影响应该是小的，因为DNA在室温下是相对稳定的。此外，在低温下保持样品块，可能会导致冷凝水的积累。这不仅可能导致块状物本身的腐蚀，还可能损坏仪器内部的电气元件。

因此，当仪器不使用时，将PCR扩增仪的盖子打开，让任何积聚的冷凝水蒸发，是一个好的做法。